10- La replicasa del bacteriófago QB
El caso mejor conocido que ilustra el caracter de parásitos moleculares de los virus, lo constituye la estructura de la ARN replicasa del bacteriófago QB, un virus con ARN de polaridad positiva que infecta ciertas estirpes de la bacteria Escherichia coli. Esta enzima está formada por una subunidad codificada por el virus y tres subunidades celulares. Una de ellas es una proteína ribosómica y las otras dos son factores de elongación de síntesis de proteínas en la bacteria.
La replicasa de QB fue la base del primer sistema de replicación de un ARN infeccioso en el tubo de ensayo. Fue puesto a punto por S.Spiegelman y con sus colaboradores en Nueva York, lograron la amplificación masiva de ARN infeccioso del fago hacia mitad de los años 60, lo que representó un hito en la biología moderna. Describieron los ensayos de transferencia en serie que consisten en disponer de una serie de tubos de ensayo con todos los reactivos necesarios para replicar ARN. Se inicia la serie añadiendo el ARN de QB al primer tubo; transcurridos unos minutos se transfiere una porción al segundo tubo y así sucesivamente. De esta manera se pueden obtener miligramos de ARN de QB a partir de unos pocos microgramos iniciales.
El experimento de transferencias en serie permitió diseñar los primeros ensayos de evolución en el tubo de ensayo. Incluso sin disponer de métodos de secuenciación de nucleótidos se detectaron importantes cambios en las moleculas replicadas en las series de transferencias. La infectividad propia del ARN tendía a bajar y el tamaño de ARN amplificado a disminuir con el número de generaciones. Dado que el sistema seleccionaba moléculas exclusivamente sobre la base de su capacidad de replicación, se acumulaban variantes cuya única habilidad era la de ser replicados eficazmente por la enzima.
La replicación de pequeños ARN variantes ha permitido a C.Biebricher de la universidad de Göttingen estudiar procesos de mutación, recombinación y selección de moléculas simples durante su replicación.
Lo más interesante del sistema es que sirve de modelo para procesos básicos que también se dan en organismos enteros con virus infecciosos.
La replicasa de QB fue la base del primer sistema de replicación de un ARN infeccioso en el tubo de ensayo. Fue puesto a punto por S.Spiegelman y con sus colaboradores en Nueva York, lograron la amplificación masiva de ARN infeccioso del fago hacia mitad de los años 60, lo que representó un hito en la biología moderna. Describieron los ensayos de transferencia en serie que consisten en disponer de una serie de tubos de ensayo con todos los reactivos necesarios para replicar ARN. Se inicia la serie añadiendo el ARN de QB al primer tubo; transcurridos unos minutos se transfiere una porción al segundo tubo y así sucesivamente. De esta manera se pueden obtener miligramos de ARN de QB a partir de unos pocos microgramos iniciales.
El experimento de transferencias en serie permitió diseñar los primeros ensayos de evolución en el tubo de ensayo. Incluso sin disponer de métodos de secuenciación de nucleótidos se detectaron importantes cambios en las moleculas replicadas en las series de transferencias. La infectividad propia del ARN tendía a bajar y el tamaño de ARN amplificado a disminuir con el número de generaciones. Dado que el sistema seleccionaba moléculas exclusivamente sobre la base de su capacidad de replicación, se acumulaban variantes cuya única habilidad era la de ser replicados eficazmente por la enzima.
La replicación de pequeños ARN variantes ha permitido a C.Biebricher de la universidad de Göttingen estudiar procesos de mutación, recombinación y selección de moléculas simples durante su replicación.
Lo más interesante del sistema es que sirve de modelo para procesos básicos que también se dan en organismos enteros con virus infecciosos.
alicia berdugo alfaro dijo
se me hace muy chido esta clase de investigaciones ya que nos ayudan a poder entender los procesos que llevan acabo los virus infectantes de enfermedades; asi como enraqueser los conocimientos adquiridos en el salon de clses
12 Mayo 2006 | 03:06 AM